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 鸡病防治

家禽腺病毒

 发布者:admin 发布时间:2016-4-1 阅读:289次 【字体: 】 上一篇 下一篇

一、病原:腺病毒(adenovirus)是一种没有包膜的直径为70~90 nm的颗粒,由252个壳粒呈廿面体排列构成。衣壳里是线状双链DNA分子,腺病毒分两个属,共约100余血清型。一般会造成呼吸系统的不适,对家禽主要造成:嗉囔炎、肠炎、肺炎。

二、流行病学(Ⅰ群腺病毒在中国鸡群的流行病学调查易邦生物)

----以血清学检测、临床诊断、解剖学诊断、病理组织学、分子生物学、病毒分离等监测手段对全国养殖重点区域的鸡群进行I群腺病毒进行跟踪监测,及时掌握疾病感染的范围和现状。2010年至今从黑、吉、京、鲁、晋、豫、苏、沪、粤九省共收集了355份疑似样品,阳性数为198份。结果显示,I群腺病毒在中国鸡群中发病率非常之高,且呈逐年上升趋势。主要造成鸡群的包涵体肝炎和心包积液两种临床类型,给养鸡企业造成较大的经济损失。

----腺病毒是全世界家禽和野禽常见的传染病原。许多腺病毒可在健康禽体内复制,症状非常轻微或不变现感染症状,但有一些因素,特别是并发感染时,腺病毒可成为条件性病原。有些腺病毒本身就是原发病原,如火鸡出血性肠炎病毒,鹌鹑支气管炎和EDS-76D

----禽腺病毒分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三个群;Ⅱ、Ⅲ群明确可以造成火鸡出血性肠炎和减蛋综合症。I群中有ABCDE五个种,12个血清型。大多数Ⅰ群的致病性还未完全明确,但不同血清型的致病性有较大差异。

----为了解I群腺病毒在中国鸡群的发病情况,青岛易邦生物工程有限公司动物疾病检测中心2010年至今从黑、吉、京、鲁、晋、豫、苏沪、粤九省收集了多份临床发病疑似的样品,进行系统的实验室诊断,最后确诊的阳性样品为198份。为系统了解I群腺病毒在中国鸡群的发病情况提供了一些基础资料。

1.材料与方法

----1.1样品来源

----20103-201412月青岛易邦从黑、吉、京、鲁、晋、豫、苏、沪、粤九省采集的临床疑似I群腺病毒的样品进行实验室检测。样品采集主要是公司技术人员和集团客户采集。

----1.2血清学检测

----取病鸡肝脏1:3匀浆后,反复冻融三次,5000r/m离心5分钟取上清与标准I群腺病毒阳性血清进行琼脂扩散试验,湿盒中37℃孵育48h观察结果。

----1.3临床诊断

----对发病鸡群进行现场流行病学调查、临床症状观察,并进行记录汇总。

----1.4解剖学诊断

----对病鸡进行解剖,观察组织脏器的病变。

----1.5病理组织学

----取肝组织于10%福尔马林液固定,石蜡包埋、切片,HE染色,光镜观察。

----1.6 病毒分离

----病鸡肝脏进行病毒分离用无菌生理盐水按13 稀释, 研磨成匀浆, 反复冻溶23, 每分钟4000 转离心10分钟, 取上清液, 2000 单位/ml 各加入青霉素、链霉素, 4℃冰箱过夜。无菌检查合格后, 卵黄囊接种6-8 日龄SPF鸡胚10, 0.2ml/, 37℃温箱培养,每天照胚2次,观察5-7天。

----1.7 PCR核酸检测及基因测序

----病鸡肝脏无菌研磨,反复冻融3次,利用试剂盒提取RNA,设计I(Hexon蛋白)FAdV48两对引物,利用一步法进行PCR检测,1%琼脂糖凝胶电泳观察结果。将阳性样品进行基因测序,并利用生物工程分析如见进行基因分析。

----1.8动物回归

----用临床表现为包涵体的肝脏组织液离心取上清液,经0.22微米(0.22µm)滤器过滤,攻毒15日龄SPF15只,设同居对照SPF3只,同时设舍外对照7只,观察实验结果。

2.结果

----2.1血清学检测

----送检病料与标准I群阳性血清进行琼脂扩散试验可以看出,阳性率较高,且逐年上升。

----2.2临床症状

----2.2.1包涵体肝炎:主要在白羽肉鸡多发,主要经垂直传播发病。发病日龄主要集中在在6-14天,死亡率1-8%,发病后3-4天出现死亡高峰,病程一般持续5-7天。有时法氏囊病活苗的免疫能加重病情。病鸡最突出的症状是腹泻,排浅黄色粘液样便,贫血、黄疸,大腿肌肉出血和迅速死亡。

----2.2.2 心包积液:蛋鸡、肉种鸡和黄鸡都有发病。流行病学调查结果显示水平传播为主要传染方式。感染鸡排毒期长达5-9周。2-30周均可发病。发病日龄主要集中在20-60日龄,最早可见7日龄的雏鸡发病;日死亡率达2-3%,病程长达20天,死淘率达15-30%;发病日龄越早,死淘率越高。表现为死亡突然,死亡快。

----2.3解剖学诊断

----2.3.1包涵体肝炎:病鸡拉硫磺色粪便,肝脏苍白,土黄色、质脆、肿大。肝脏、肌肉有出血斑,个别鸡皮下有黄色胶冻样渗出。

----2.3.2 心包积液:心包腔中有黄色透明的积液,肺水肿,肝脏出血、肿胀色浅。肾脏出血、胰脏出血坏死。

-----腺胃水肿、腺胃肌胃交界处出血

 ----2.4病理组织学

----通过对肝脏的组织病理学检查,肝细胞可见大、而圆的嗜碱性包涵体

----2.5病毒分离

----结果发现卵黄囊接种后47 天胚胎死亡, 死亡胚胎缩小,周身出血。

---2.6 PCR检测、基因测序及分析

----2.6.1 PCR检测:对送检的样品处理后进行核酸检测,电泳结果显示样品中检测到目的片段,且阴阳性对照成立。图4为部分样品检测结果图。

----2.6.2基因测序与分析

----阳性样品核酸产物送至大连宝生物进行基因测序,测序结果利用生物工程分析软件MEGA6进行基因分析,结果显示在中国流行I群腺病毒主要有两个血清型;临床表现包涵体肝炎均为FAdV-8/b,心包积液综合征为FAdV-4型。

----2.7 SPF鸡回归试验

----攻毒组和同居组在攻毒后6-10天出现发病,表现为嗜睡,精神萎靡,采食废绝。病死鸡剖检肝脏黄色坏死,脾脏坏死,骨髓黄染,病原检测FAdV阳性。

3.讨论与分析

----3.1通过对I群腺病毒的流行病学调查,可以发现该病在中国鸡群中发病率较高,且呈逐渐上升趋势。发病的宿主范围越来越广,白羽肉鸡、蛋鸡、黄羽鸡、肉种鸡均可感染发病。

----3.2中国流行I群腺病毒主要有三个血清型;临床表现包涵体肝炎均为FAdV-8bFAdV-11和这与澳大利亚发生情况相同,1988年澳大利亚3周龄以下的鸡群爆发包涵体肝炎(IBH),死亡率达到30%,检测血清为FAdV-678型;1989年新西兰爆发IBH分离毒株多数为8型。临床表现为心包积液综合症的均为FAdV-4,这与1987年以后在巴基斯坦、印度、科威特、伊朗及南美等国家爆发的血清型一致。研究表明,FAdV-4型毒力较强,本身就可以引起易感鸡群的发病。

----3.3针对I群腺病毒的防控;加强鸡场生物安全的控制是防治该病关键。经调查发现,发病鸡群多数发生在养殖密度大的地区和饲养时间长的养殖场,这些鸡场无有效的生物安全措施,环境污染严重。

----3.4鸡群应做好免疫抑制性疾病的防控,特别是法氏囊病、传染性贫血等疾病的感染,这些因素均可导致腺病毒的感染和发病。

----3.5 针对I群腺病毒的免疫问题;越来越多的证据表明,某些型病毒可能是原发病原,因而免疫预防显得更重要。母源抗体1:32可以有效预防IBH。在巴基斯坦疫苗的使用在心包积液的预防中起到了显著作用。建议在污染比较严重的地区,进行疫苗的免疫,提高下一代的母源抗体,以保护鸡群的感染和发病。灭活疫苗对该病有较好的防控效果。灭活疫苗有两种;一种是利用本场发病鸡的肝脏制备自家苗。另一种是利用分离I群禽腺病毒毒株制备的油乳剂灭活疫苗。

三、预防方案:

强烈抗应激:小鸡接回家后,长期使用维喜肽1000斤料加入一公斤,长效干扰素1吨料加入500克,效果非常突出,长葛县有11个鸡场使用,都很好,平安度过育雏及青年鸡,产蛋性能很好。

防继发感染:有效使用支原体和大肠杆菌药物

四、治疗:

1、有效抗病毒:小柴胡散+正泰合用连用5天

2、治疗大肠杆菌:长江+立沙+阿莫西林+护健

3、使用5天药后使用新城疫疫苗+肾型传支5倍左右一次

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